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人促紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
發(fā)布時(shí)間:2025/4/30瀏覽:469次
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  以下是關(guān)于人促紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明:

  BS-10009 人促紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  雙抗體夾心法?:采用包被抗人EPO抗體的微孔板捕獲樣本中的EPO,再通過酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物,經(jīng)顯色反應(yīng)測(cè)定濃度。

  顯色機(jī)制?:底物TMB在過氧化物酶催化下顯藍(lán)色,終止后轉(zhuǎn)為黃色,OD值與EPO濃度成正比。

  二、試劑盒組成

  標(biāo)準(zhǔn)品?:需用蒸餾水稀釋至400mIU/mL,梯度稀釋后使用。

  酶標(biāo)試劑?:HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體。

  洗滌液/終止液?:濃縮洗滌液需20倍稀釋,終止液為硫酸溶液。

  三、樣本處理

  血清/血漿?:室溫靜置后離心取上清,避免反復(fù)凍融。

  組織勻漿?:PBS沖洗后勻漿,離心取上清。

  細(xì)胞培養(yǎng)上清?:直接離心后檢測(cè)。

  四、操作步驟

  加樣?:空白孔加稀釋液,標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔各加100μL,37℃孵育2小時(shí)。

  洗滌?:棄液體后加檢測(cè)抗體A/B工作液,分別孵育1小時(shí),洗滌3-5次。

  顯色?:加TMB底物避光反應(yīng)15-30分鐘,終止后450nm測(cè)OD值。

  五、注意事項(xiàng)

  預(yù)實(shí)驗(yàn)?:建議使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)以優(yōu)化條件。

  時(shí)間控制?:加樣間隔不超過10分鐘,避免孵育時(shí)間差異。

  保存?:試劑2-8℃保存,樣本-20℃以下凍存。

  六、結(jié)果計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,樣本濃度通過回歸方程計(jì)算。

  如需更詳細(xì)的步驟圖示或特殊樣本處理方法,可參考試劑盒附帶的完整說明書。

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